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位點特異性的蛋白質光交聯探針已經成為研究活細胞内蛋白質-蛋白質相互作用的關鍵工具。陳鵬課題組長期緻力于發展基于遺傳密碼子拓展的蛋白質光交聯技術。在之前的工作中他們設計了高效的光敏感非天然氨基酸交聯探針(DiZPK),能夠廣泛地用于捕捉活細胞内的蛋白-蛋白相互作用。(Nat. Chem. Biol.,2011, 7, 671-677; J. Am. Chem. Soc.,2011, 133, 20581-20587.)

最近,在上述工作的基礎之上,該課題組發展了“可切割”的新一代光交聯探針DiZSeK(下圖)。與原有探針相比,新一代的探針在高效捕捉蛋白相互作用的同時,其骨架中所含的硒原子能夠在過氧化氫氧化條件下斷裂,從而實現對光交聯獲得的“誘餌蛋白-靶标蛋白”複合物的分離。進一步的,他們發展了能夠與靶标蛋白上産生的次硒酸基團發生特異反應的捕獲試劑,實現了對靶标蛋白的特異标記和富集。上述新技術的發展,使他們在後續二維凝膠電泳實驗中有效去除了誘餌蛋白的幹擾,完成了對特定蛋白的全細胞靶标蛋白的質譜分析與鑒定。新一代“可切割型”光交聯探針的開發,将有力地推動基于蛋白質光交聯技術的蛋白質組學研究。該工作近日在美國化學會志上發表(Lin SX, et al,J. Am. Chem. Soc. 2014, DOI10.1021/ja504371w),并被美國化學會的官方雜志 “Chemical & Engineering News”以News of the Week的形式進行了報道。陳鵬實驗室的研究生林世賢是該文的第一作者,同時化學學院的何丹,張帥,生命科學聯合中心的龍騰和鳳凰平台質譜中心的孟榮老師為論文的發表做出了重要的貢獻。此項研究得到了國家自然科學基金委、科技部和北大-清華生命科學聯合中心的資助。 原文鍊接:http://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/ja504371w

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